琼脂
3.1 备料
3、内容
2、职责
起草人：原料名称
蛋白胨
CaCO3
规程0.5%数量
1、目的与适用范围
3.2.1 一次传代培养荃配方
(NH4)2HPO4起草日期： 分发范围：菌种室颁布部门：质量保证部题目：黑曲霉菌种传代培养操作菌种室人员对本规程实施负责。
审核人：本规程适用于菌种的传代培养操作。
审核日期： 药用规格
4%
2%
0.023%
3.2.2 一次传代培养荃的制备
3.2 传代培养操作前的准备工作
术成功，保证产品质量的安全、稳定。
药用
药用
药用
储部不具备情况下，可派专人购买符合标准的培养荃。
标 准 操 作 规 程 （ S O P） 按配1000ml的量，将上表中的配方原料精确称取，投入有刻度的1000ml三角
建立黑曲霉菌种传代培养操作规程，规范菌种传代培养操作，确保菌种传代技
烧瓶中加纯化水，使成1000ml，用玻璃棒搅拌均匀后，分别装入20支斜面培养荃试
菌种室人员按照一次传代培养荃配方，填好领料单报总经理批准，送仓储部备料，仓
3.1.1 菌种室人员根据接种菌株发育情况，待菌株发育良好，具备传代要求条件时，
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K2HPO4原料名称
数量0.03%
药用规格
分发部门：质量控制部编号：SOP05-TY038-ⅠMgSO4·7H2O
葡萄糖
水
批准人：0.01%
3%
批准日期： 1000mL
分发号：生效日期：药用
药用
纯化水
3.7.1 备料
3.3 传代接种操作。
3.7 菌种的五次传代培养
入接种室进行无菌接种。
25℃-28℃的恒温培养箱中培养。
藏在5℃-10℃的冷藏箱中，控制其菌种的发育。
3.7.2 五次传代培养荃配方
题目：黑曲霉菌种传代培养操作规程告知供应部采购合格培养荃。
传代培养的菌种扩大10倍进行四次传代培养。
育良好时，再进行二次传代培养，并做好菌种发育观测记录。
好洁净室的清洁、消毒，并做好相关用具、洁具的准备工作。
传代培养荃的斜面培养荃试管中，用无菌药棉和经消毒的塞密闭试管，然后，放入
接种培养的菌种，用接种针分别刮下已生长发育的菌体，分别移植到20支装有一次
3.4 接种毕，做好清洁卫生和清场工作，并做好接种操作记录。
标 准 管 理 规 程 （ S M P） 操作人员进入二更，在100级层流操作台上，按无菌操作要求进行传代接种操
荃的配方，将二次传代培养的菌种，按一次传代培养的接种操作，扩大10倍进行三
的菌种按一次传代培养操作，扩大10倍进行二次传代培养；同样，按一次传代培养
管中。然后放入消毒罐中，加热至120℃保温灭菌半小时，取出冷却至室温，然后送
作。操作人员将接种针在酒精灯火焰上消毒一分钟后，放冷，从恒温培养箱中取出已
不进行下一次传代培养的菌种，可将培养的菌种从25℃-28℃培养箱中取出，贮
先按五次传代培养荃配方填好领料单，申报总经理直接批准，送仓储部领料，或提前
次传代培养；同样，按一次传代培养荃的配方，按一次传代培养的接种操作，将三次
3.2.3 按规定进入万级洁净室一更后，脱鞋、戴帽、更衣，搞好人的清洁、消毒，搞
3.6 菌种的二次至四次传代培养操作，按照一次传代培养荃的配方，将一次传代培养
3.5 待培养5天后，在洁净室内取出菌种，用1万级显微镜观察菌株发育情况，待发
菌种室根据车间生产和五次传代培养菌种贮存数量情况，需做五次传代培养时，
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编号：SMP05-TY038-Ⅰ种。
接种操作。
养箱中培养。
麸皮原料名称碳酸钙葡萄糖水
冷藏箱中冷藏侍用。3.7.4 五次传代接种操作
题目：黑曲霉菌种传代培养操作规程3.7.3 五次传代培养荃的制备
1000g1000ml
数量
10g
50g
好菌种发育良好，即可投入车间放大培养，投入生产使用。
3.7.4.3 接种毕，做好清洁卫生和清场工作，并做好接种操作记录。
洁、消毒，搞好洁净室的清洁、消毒，并做好相关用具、洁具的准备工作。
标 准 管 理 规 程 （ S M P） 将接种针放在酒精灯火焰上消毒1分钟后放冷，从恒温培养箱中取出四次传代
培养的菌种，视菌落发育情况，按扩大8-10倍的比例进行五次传代培养，用接种针
使成1000ml培养荃，搅拌均匀，装入斜面扁形培养瓶中，然后将斜面扁形培养瓶放
用无菌药棉和已消毒的塞子将斜面扁形培养瓶口盖紧，密闭放入25℃-28℃的恒温培
进消毒罐，加热到120℃，保温灭菌半小时，冷却后取出放冷，送洁净室进行无菌接
分别刮下已生长发育的菌体，分别移植到已装有五次传代培养荃的斜面扁形培养瓶中，
3.7.4.4 待培养四天后逐日观察菌落发育情况，一般情况培养5天后进行检测，并做
3.7.4.1 按规定进入成绩级洁净室一更后，操作人员脱鞋、鞋帽、更衣，搞好人的清
3.7.4.2 操作人员进入二更，在100级层流操作台上，按无菌操作要求进行五次传代
不投入车间生产的五次传代培养菌种，从培养箱中取出，放入5℃-10℃的恒温
按上表配方比例，每次总量按1000ml配制，精确称取培养荃原料，加净化水，
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编号：SMP05-TY038-Ⅰ药用
食用
食用
规格
纯化水
