２０２０年０２月 牡丹江医学院学报
第４１卷 第１期 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＭｕＤａｎＪｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｖｏｌ４１ Ｎｏ１ ２０２０
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抑癌基因ＩＤ４、ＷＴ１、ＧＬＩＰＲ１启动子区异常甲基化在白血病患者中的表现
刘晓丹１ꎬ陈 琛２
(滨州医学院附属医院１.血液科ꎻ２.心内科ꎬ山东 滨州 ２５６６００)
摘要: 目的 研究抑癌基因ＩＤ４、ＷＴ１、ＧＬＩＰＲ１启动子区异常甲基化在白血病患者的表现ꎮ方法 以４３例志愿者为对ＧＬＩＰＲｌ基因启动子区甲基化状态ꎬＲＴ－ＱＰＣＲ检测其相关ｍＲＮＡ表达情况ꎮ结果 白血病组ＩＤ４、ＧＬＩＰＲ１基因启动子区甲基化程度均高于对照组ꎬＷＴ１低于于对照组ꎬ差异均有统计学意义(Ｐ<０.０５)ꎻＩＤ４、ＧＬＩＰＲ１ｍＲＮＡ在ＡＭＬ、ＡＬＬ、ＣＭＬ患者中的表达均低于对照组ꎬＷＴ１ｍＲＮＡ在ＡＭＬ、ＡＬＬ、ＣＭＬ患者中的表达高于对照组ꎬ均有统计学差异(Ｐ<０.０５)ꎬＡＭＬ、ＡＬＬ、ＣＭＬ患者ＩＤ４、ＷＴ１ｍＲＮＡ表达组间比较ꎬ无统计学差异(Ｐ>０.０５)ꎬＧＬＩＰＲ１ｍＲＮＡ表达任意组间均有统计学差异(Ｐ<０.０５)ꎮ结论 抑癌基因启动子区甲基化及其蛋白表达的研究有利于深入研究白血病发病的分子机制ꎬ并可能为白血病的基因治疗及预后提供临床依据ꎮ
关键词: 抑癌基因ꎻ白血病ꎻ甲基化
中图分类号:Ｒ７３７.７ 文献标识码:Ａ 文章编号:１００１－７５５０(２０２０)０１－００１３－０３
照ꎬ６７例初发白血病患者[包括急性淋巴细胞白血病(ＡｃｕｔｅｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｉｃｌｅｕｋｅｍｉａꎬＡＬＬ)２７例、急性髓系白血病(Ａｃｕｔｅｍｙｅｌｏｉｄ
ｌｅｕｋｅｍｉａꎬＡＭＬ)１９例以及慢性粒细胞白血病(ＣｈｒｏｎｉｃｍｙｅｌｏｉｄｌｅｕｋｅｍｉａꎬＣＭＬ)２１例]为白血病组ꎬＭＳ－ＰＣＲ检测两组ＷＴｌ、ＩＤ４、
ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎａｂｎｏｒｍａｌｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｍｏｔｅｒｒｅｇｉｏｎｓｏｆｔｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｇｅｎｅｓＩＤ４ꎬＷＴ１ａｎｄＧＬＩＰＲ１ａｎｄｌｅｕｋｅｍｉａＬＩＵＸｉａｏ－ｄａｎｅｔａｌ
(ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｅｍａｔｏｌｏｇｙꎬＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＢｉｎｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅꎬＢｉｎｚｈｏｕ２５６６００ꎬＣｈｉｎａ)
ＧＬＩＰＲ１ｉｎｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆｌｅｕｋｅｍｉａ.Ｍｅｔｈｏｄｓ ＴｈｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｓｔａｔｕｓｏｆＷＴｌꎬＩＤ４ａｎｄＧＬＩＰＲｌｇｅｎｅｐｒｏｍｏｔｅｒｒｅｇｉｏｎｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＭＳ－ＰＣＲｉｎ６７ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｐｒｉｍａｒｙｌｅｕｋｅｍｉａꎬａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅｓｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＲＴ－ＱＰＣＲ.Ｒｅｓｕｌｔｓ ＴｈｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｍｏｔｅｒｒｅｇｉｏｎｏｆＩＤ４ａｎｄＧＬＩＰＲ１ｇｅｎｅｉｎｌｅｕｋｅｍｉａｇｒｏｕｐｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐꎬａｎｄｔｈｅＷＴ１ｏｆｔｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｇｅｎｅｗａｓｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ(Ｐ<０.０５).ＴｈｅｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｇｅｎｅＩＤ４ａｎｄＧＬＩＰＲ１ｉｎＡＬＬａｎｄＣＭＬｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ(Ｐ<０.０５).ＴｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｗａｓｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔａｍｏｎｇＡＭＬꎬＡＬＬａｎｄＣＭＬｇｒｏｕｐｓ.ＴｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｇｅｎｅＩＤ４ａｎｄＷＴ１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｍｏｎｇｇｒｏｕｐｓ(Ｐ>０.０５)ꎬｂｕｔｔｈｅｒｅｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎＧＬＩＰＲ１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎａｎｙｇｒｏｕｐ(Ｐ<０.０５).Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｐｒｏ￣ｍｏｔｅｒｒｅｇｉｏｎｏｆｔｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｇｅｎｅｉｓｈｅｌｐｆｕｌｔｏｆｕｒｔｈｅｒｓｔｕｄｙｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｌｅｕｋｅｍｉａꎬａｎｄｍａｙｐｒｏｖｉｄｅｃｌｉｎｉｃａｌｅｖｉ￣ｄｅｎｃｅｆｏｒｇｅｎｅｔｈｅｒａｐｙａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓｏｆｌｅｕｋｅｍｉａ.
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ: ＴｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｇｅｎｅꎻＬｅｕｋｅｍｉａꎻＭｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｒｏｌｅｏｆａｂｎｏｒｍａｌｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｉｎｐｒｏｍｏｔｅｒｒｅｇｉｏｎｓｏｆｔｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｇｅｎｅｓＩＤ４ꎬＷＴ１ａｎｄ
ＡＭＬꎬＡＬＬａｎｄＣＭＬｐａｔｉｅｎｔｓｗａｓｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ.ＴｈｅｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｇｅｎｅＷＴ１ｉｎＡＭＬꎬ
甲基化是蛋白质和核酸的一种重要的修饰ꎬ调节基因的表达和关闭ꎬ也是表观遗传研究的前沿领域ꎮ研究显示[１]:脱氧核糖核酸(ｄｅｏｘｙｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃꎬＤＮＡ)异常甲基化与肿瘤发生密切相关ꎬ尤其抑癌基因启动子异常高甲基化及ＤＮＡ的广泛低甲基化可能为血液系恶性肿瘤发生的重要分子机制ꎮ本研究选择ＩＤ４、ＷＴ１、ＧＬＩＰＲ１三个白血病抑癌基因ꎬ着重于研究ＩＤ４、ＷＴ１、ＧＬＩＰＲ１抑癌基因甲基化及基因表达水平并分析抑癌基因ＩＤ４、ＷＴ１、ＧＬＩＰＲ１启
动子区异常甲基化在白血病发病的作用机制ꎬ为白血病基因水平的防治提供临床指导ꎮ
１ 资料与方法
１.１ 研究对象 选取２０１６年１月至２０１９年１月本院确诊为初发白血病患者６７例作为本次研究的白血病组ꎬ其中男４４例ꎬ女２３例ꎬ年龄１７~４６岁ꎬ平均(３１.３±８.５)岁ꎬ包括:急性淋巴细胞白血病(ＡｃｕｔｅｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｉｃｌｅｕｋｅｍｉａꎬＡＬＬ)２７例、急性髓系白血病
作者简介:刘晓丹(１９８１－)ꎬ男ꎬ硕士ꎬ主治医师ꎬ研究方向:血液系统恶性肿瘤及分子靶向治疗ꎮ 通讯作者:陈琛ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｃｈｅｎ０５４３ｃｃ＠１２６.ｃｏｍꎮ
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第４１卷 第１期
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Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＭｕＤａｎＪｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｖｏｌ４１ Ｎｏ１ ２０２０
牡丹江医学院学报 Ｆｅｂ２０２０
(Ａｃｕｔｅ胞白血病ｍｙｅｌｏｉｄ(ＣｈｒｏｎｉｃｌｅｕｋｅｍｉａꎬＡＭＬ)ｍｙｅｌｏｉｄｌｅｕｋｅｍｉａꎬＣＭＬ)１９例以及慢性粒细２１例ꎬ白血病诊断及分型符合ＦＡＢ诊断及标准ꎻ以同期４３例非肿瘤性疾病自愿者为对照组ꎬ男２８例ꎬ女１５例ꎬ年龄１５~４５岁ꎬ平均(３３.１±１０.７)岁ꎬ包括:巨幼细胞性贫血１３例、缺铁性贫血２０例ꎬ血小板减少性紫癜１０例ꎮ两组研究对象在性别、年龄构成具有可比性(Ｐ>０.０５)ꎬ受试者均签署知情同意书ꎬ享有知１.２ 情权ꎮ
１.２.１ 研究方法骨髓液材料准备３ｍＬꎬ对单个核细胞行基因组 受试者肝素抗凝于髂前上棘取ＤＮＡ提取、纯化ꎬ试剂使用日本宝生物公司产品ꎬ分光光度计鉴定２５ｍｉｎꎬ提取质加氢醌及亚硫酸氢钠混合均匀量ꎬ稀释物理剪切ꎬ加ＮａＯＨ５５℃３７℃孵育孵育
后纯化备用１.２.２ ꎮ
１６ｈ动子区甲基化状态采用甲基化特异性ＰＣＲ方法 抑癌基因ＩＤ４、ＷＴ１、ＧＬＩＰＲ１启ａｔｉｏｎ物:
－ｓｐｅｃｉｆｉｃＰＣＲꎬＭＳ－ＰＣＲ)检测ꎬ甲基化特异性引ＰＣＲ(Ｍｅｔｈｙｌ￣３’ꎻＩＤ４ＩＤ４－ＭＦ:５'－ＴＴＴＴＡＴＡＡＡＴＡＴＡＧＴＴＧＣＧＣＧＧＣ－３’ꎻ
－ＭＲ:５'－ＧＡＡＴＡＴＣＣＴＡＡＴＣＡＣＴＣＣＣＴＴＣＧＡ－－ＷＴｌＣＧ３’:－３’ꎻ
ＷＴｌ－ＭＦ:５'－ＭＲ:５’－ＴＴＴＧＧＧＴＴＡＡＧＴＴＡＧＧＣＧＴＣＧＴＣＧ－ＡＣＡＣＴＡＣＴＣＣＴＣＧＴＡＣＧＡＣＴＣ￣
ＧＣＧＧＣＧＬＩＰＲｌＣＴＣＴＡＡＴＣＧＡＡ－３’:－ＧＬＩＰＲｌＭＦ:５’－－ＭＲ:５ＴＡＡＴＴＡＴＡＴＴＴＴＴＡＧＡＡＡＴＴ￣'－ＡＣＴＡＴＴＡＡＴＴＴＣＡＣ￣
４ｍｉｎꎻ９４℃ＲＴ－ＰＣＲ(３０ｓ)扩增反应条件如下－３’ꎻ
→４５℃(３０ｓ)→７２℃:ＩＤ４:９４℃预变性
循环(４５ｓ)ꎬ７２℃延伸７ｍｉｎꎻＧＬＩＰＲＩ:９４℃→５８℃延伸(３０ｓ)(７ｍｉｎ)ꎻＷＴｌ:９４℃→７２℃(４５ｓ)共预变性(４５ｓ)４０个循环４ｍｉｎꎻ９４℃共３０个ꎬ７２℃(７ｍｉｎ)ꎮ
４５℃(３０ｓ)→７２℃(４５ｓ)预变性共３０５ｍｉｎꎻ９４℃个循环ꎬ７２℃(３０ｓ)延伸
→
抑癌基因ｍＲＮＡ的表达检测采用ＲＴ－ＱＰＣＲ检
测ꎬＲＴ逆转录试剂盒使用宝生物工程有限公司ꎬ从珠江医院购买人急性髓系细胞白血病细胞株６０及慢性粒细胞白血病细胞株ＨＬ－养液３７℃ꎬ５％ＣＯ２培养传代ꎬ取对数生长期细胞用Ｋ５６２ꎬＲＰＭＩ１６４０培
于实验ꎮ使用日本宝生物公司ＲＮＡｉｓｏＰＬＵＳ试剂盒提取ＱＰＣＲＩＤ４:定量检测抑癌基因ＲＮＡꎬ行紫外分光光度计检测ＯＤ值ꎬＲＴ－上游引物:５'－ｍＲＮＡＴＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＡ表达情况ꎮ
ＡＣＡＣ￣ＣＧＡＣＣＣＣＣＣＴＣＴＣＴＡＧＴＧＣＴＣＣＴＧ－３’ꎻ下游引ＧＡＴＡＡＣＣＡＣＡＣＡ－３’ꎻ物:ＷＴｌ:５'上游引物－ＴＴＣＣＣＣＣＴ:５'－
物ＣＡＣＡＣＧＴＣＧＣＡＣＡＴＣＣＴＧＡＣＧＣＣＣＡＴＣＡＡＴ－－３’ꎻＧＬＩＰＲＩ:３’ꎻ下游引物上游引
:５’－５’:５’－ＡＡＴＡＧＣＣＴＧＧＡＴＧＧＴＴＴＣＴＴ－３’ꎻ下游引物扩增反应条件－ＣＡＴＡＧＴＣＣＴＧＧＡＴＴＴＣＧＴＣＡ(３０ｓ)延伸(→７ｍｉｎ６０℃)ꎻ(３０ｓ):９４℃－３’ꎻ反应条件:ＩＤ４:ＷＴｌ→预变性扩７２℃增反(４５ｓ)(４ｍｉｎ)应条共进入循环件４０:个循环→９４℃预ꎻ７２℃９４℃(４ｍｉｎ)进入循环３０个循环→ꎻ７２℃９４℃(４５ｓ)延伸(７ｍｉｎ)ꎻＧＬＩＰＲＩ→５５℃(４５ｓ)→变７２℃性反应(４５ｓ)条共扩增
(３０ｓ)件:９４℃预变性(５ｍｉｎ)进入延伸(８ｍｉｎ)ꎮ
→４９℃(３０ｓ)→７２℃(４５ｓ)共３０个循环循环→ꎻ７２℃９４℃１.３ 究数据进行统计学分析统计学处理 采用统计学软件ꎬ使用卡方检验比较抑癌基ＳＰＳＳ２２.０对研因ＩＤ４、ＷＴ１、ＧＬＩＰＲ１基因启动子区甲基化百分比、率ｍＲＮＡꎬ抑癌基因均值比较采用方差分析ｍＲＮＡ表达以２－▲Ｃｔꎬ组间两两比较采用表示ꎬ抑癌基因２ ＳＮＫ结果
法分析ꎬ以Ｐ<０.０５有统计学意义ꎮ
２.１ 基化情况两组抑癌基因 两组抑癌基因ＩＤ４、ＷＴ１ＩＤ４、ＷＴ１、ＧＬＩＰＲ１、ＧＬＩＰＲ１启动子区甲启动子区甲基化经卡方检验分析均有统计学差异０５)ꎬ(Ｐ<０.度均高于对照组白血病组ＩＤ４、ＧＬＩＰＲ１ꎬ抑癌基因基因启动子区甲基化程ＷＴ１低于于对照组ꎬ差异均有统计学意义(Ｐ<０.０５)ꎮ见表１ꎮ
表１ 两组抑癌基因ＩＤ４、ＷＴ１、ＧＬＩＰＲ１启动子区甲基化情况[ｎ(％)]组别ｎＩＤ４ＷＴ１ＧＬＩＰＲ１对照组４３２(４.６５)３９(９０.７０)５(１１.６３)白血病组χ６７
５５(８２.０９)２０(２９.８５)４０(５９.７０)２
Ｐ
６５０.０００
.４４６３６０.０００
.２５２２６０.０００
.８２２２.２ ＧＬＩＰＲ１ＡＭＬ、ＡＬＬ、ＣＭＬ与对照组抑癌基因ＩＤ４、ＷＴ１、组抑癌基因ｍＲＮＡＩＤ４、ＷＴ１、ＧＬＩＰＲ１表达比较 ＡＭＬ、ＡＬＬ、ＣＭＬｍＲＮＡ表达比较经与对照方差分析均有统计学差异ＣＭＬ组ꎬ抑癌基因抑癌基因(Ｐ<０.０５)ꎬＡＭＬ、ＡＬＬ、ＷＴ１ｍＲＮＡＩＤ４、ＧＬＩＰＲ１ｍＲＮＡ表达高于对照组表达均低于对照ꎬ差异均有统计学意义(Ｐ<０.０５)ꎬＡＭＬ、ＡＬＬ、ＣＭＬ三组抑癌基因(ＩＤ４、ＷＴ１ｍＲＮＡ表达组间比较ꎬ无统计学差异差异Ｐ>０.０５)ꎬＧＬＩＰＲ１ｍＲＮＡ(Ｐ<０.０５)ꎮ见表２ꎮ
表达任意组间均有统计学２０２０年０２月 牡丹江医学院学报
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表２ ＡＭＬ、ＡＬＬ、ＣＭＬ与对照组抑癌基因
组别ｎＩＤ４、ＷＴ１、ＧＬＩＰＲ１ＩＤ４ｍＲＮＡ表达比较ＷＴ１(ｘ±ｓ)
ＧＬＩＰＲ１对照组ＡＭＬ４３１９０.８６３±０.２６５０.０３６±０.０１４ＣＭＬＡＬＬ２７０.０３８９±０.０１３０.０３２±０.０１１０.５８７±０.１１１０.５５６±０.１２３０.１４５±０.０４３Ｆ２１
０.０３７±０.０１５０.６１１±０.１０９０.３１８±０.０６８Ｐ
２１３０.５５４±０.１１９０.４５１±０.１３７０.０００
.４８６３４２０.０００
.５５７７６０.０００
.２７４３ 讨论
随着现代表观遗传学的发展ꎬ人们对肿瘤发生机制有了新的认识ꎮ一些表观遗传修饰虽未影响ＤＮＡ双链序列ꎬ但其基因的表达发生了较大程度改变ꎮ表观遗传的方式常见包括:组蛋白共价修饰ꎬＤＮＡ甲基化ꎬ染色质的高级结构ꎮＤＮＡ甲基化在表观遗传机制研究较早ꎬ也较为深入ꎮＤＮＡ序列上特定的碱基在ＤＮＡ甲基转移酶(ＤＮＭＴ)的催化作用下ꎬ以共价键结合甲基供体ｓ－腺苷甲硫氨酸(ＳＡＭ)ꎮ研究发现[２]区可抑制抑癌基因的表达:细胞中ＤＮＡ高甲基化出现在抑癌基因的启动子ꎬ致使细胞生长失衡从而导致肿瘤的发生ꎮ也有临床研究证明[３]胞中普遍存在ＤＮＡ甲基化酶活性过高的情况:在肿瘤细ꎮ作为血液系常见的恶性肿瘤ꎬ白血病源于造血干细胞恶性克隆ꎮ增殖失控、分化障碍、凋亡受阻的病变细胞在骨髓和其他造血组织中大量累积、浸润抑制正常造血ꎮ研究白血病发病的分子机制与抑癌基因甲基化的关系具有重要的临床意义ꎬ其为白血病的去甲基化治疗新思路提供了理论基础ꎮ
抑癌基因ＩＤ４又称分化抑制因子４ꎬ位于人染色体６ｐ２１.３~２２ꎬ为碱性螺旋环螺旋转录因子的抑制因子ꎬ可抑制碱性转录因子活性ꎬＩＤ４可抑制细胞的分化及ＤＮＡ结合ꎬ参与细胞分化、增殖、凋亡ꎬ另有研究ＷＴ１发现其与肿体１１ｐ１３ꎬ基因最初分离于瘤其编码产物对细胞Ｗｉｌｍｓ形成、瘤细胞侵袭及转移有关[４]ꎮＧ０及ꎬＧ１定位于人染色期转入Ｓ期有较强的抑制作用[５]细胞瘤为髓系单核细胞分化的标志ꎮＧＬＩＰＲ１基因克隆于人胶质[６－７]ꎬ表达可诱导肺癌、结直肠癌及前列腺癌细胞凋亡:ＧＬＩＰＲ１其功能涉及细胞凋亡与免疫防御ꎬ研究发现基因过ꎬ具有抑制肿瘤细胞作用ꎬ为机体的抑瘤基因其ｍＲＮＡ:ＧＬＩＰＲ１蛋白表达水平的监测及患者的临床疗效基因为ＡＭＬ的甲基化沉默基因ꎮ有学者认为[８]ꎬ对的评ＡＬＬ、ＣＭＬ价具有指导作用ꎮ本研究数据显示:ＡＭＬ、基化程度及其抑癌基因ｍＲＮＡＩＤ４、ＧＬＩＰＲ１表达均低于对照组基因启动子区甲ꎬ而抑癌基因ＷＴ１则在ＡＭＬ、ＡＬＬ及ＣＭＬ中呈现低甲基化ꎬ其编码产物ｍＲＮＡ呈现高表达ꎬ与对照组比较差异均
具有统计学意义ꎬ考虑原因主要是ＤＮＡ甲基化是基因表达的重要机制之一ꎬ该项检测对肿瘤恶性程度的判断具有重要意义ꎬ低甲基化伴随ｍＲＮＡ表达增高ꎬ可以有效反应肿瘤恶性程度及进展情况ꎬ具有重要的临床意义ꎬ且抑癌基因ＷＴ１在白血病的发生发展过程中起着非常重要的作用ꎮ基因甲基化导致转录沉默缺失是多种肿瘤发生的分子机制[９]基因启动子区甲基化可负性相关ｍＲＮＡ的表ꎮ达ꎬ甲基化状态与[１０]动子区甲基化程度也是监测白血病病情严重程度的ꎮ本研究数据支持上述观点ｍＲＮＡ蛋白表达水平呈现一定的负相关ꎬ抑癌基因启一个可能观察指标[１１]抑癌基因启动子区甲基化为抑癌基因表达下调及ꎮ
缺失的重要机制ꎬ同时也是可能引起白血病发生的重要机制之一ꎬ目前基于抑癌基因启动子区甲基化的白血病基因诊断、治疗仍处于起步阶段[１２]子区甲基化及其蛋白表达的研究对白血病发病的分子ꎬ抑癌基因启动机制研究开辟了新的领域ꎬ在基因水平为白血病的治疗及预后评估提供了新的发展方向ꎮ
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