Tris缓冲液的特性

Tris中文品名为三羟甲基氨基甲烷；氨基丁三醇；又名缓血酸胺；2-氨基-2-（羟甲基）-1,3-丙二醇。是一种白色结晶或粉末，溶于乙醇和水，微溶于乙酸乙酯、苯，对铜、铝有腐蚀作用，是一种有刺激性的化学物质。Tris有很高的缓冲能力，在水中溶解度高，对很多酶呈惰性反应，它的这一特性使得Tris成为用于许多生化目的非常满意的缓冲液。一般用于稳定反应体系的pH，在pH7.5-9.0之间有较强的缓冲能力。三羟甲基氨基甲烷Tris白色粉末状一、Tris缓冲液的优点①因为Tris碱的碱性较强，所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液；②对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。二、Tris缓冲液的缺点①缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.1；湖北新德晟材料科技有限公司②温度效应大，温度变化对缓冲液pH值的影响很大，△pKa／℃＝－0.031，例如：4℃时缓冲液的pH＝8.4，则37℃时的pH＝7.4，所以一定要在使用温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃～4℃；③易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封；④此缓冲液对某些pH电极发生一定干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。三、Tris缓冲液pH范围Tris缓冲液在生物化学研究中使用较广泛的一种缓冲剂，它的常用有效pH范围是在“中性”范围，如：Tris-HCl缓冲液：pH＝7.5～8.5Tris-磷酸盐缓冲液：pH＝5.0～9.0除TRIS-hcl外，TRIS还有多种衍生化缓冲:TBS=Tris-HCl+NaCl+KCl常用来清洗免疫染色组织或Westernblotting中的Westernblotting膜;TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20，一种常用于WesternBlotting的膜缓冲液;TE=Tris-HCl+EDTA，对DNA碱基具有保护作用，常用于DNA的稳定和储存;TAE=Tris碱+乙酸+EDTA，是一种广泛应用于短片段DNA电泳的缓冲体系;TBE=三碱基+硼酸+EDTA，适用于长期DNA电泳，对小片段有较好的分离效果。四、Tris缓冲溶液的应用：湖北新德晟材料科技有限公司在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系稳定pH值；在凝胶中使用Tris-HCl缓冲体系稳定pH值；被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂；Tris缓冲液的低离子强度特点还可用于线虫的中间纤维的形成；在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，可用于DNA的稳定和存储；将调节pH值的酸溶液换成乙酸，获得“TAE缓冲液”，换成硼酸可获得TBE缓冲液。这两种缓冲液常用于核酸电泳实验中。五、Tris缓冲液配置方法：配制德晟Tris-HCl缓冲液的方法有两种：分别配制0.05mol/LTris和0.05mol/LHCl溶液，然后按常用表中所列体积混合即可。但是由于标准浓度的稀盐酸不易配制，所以常用另一种方法：以配置1L0.1mol/L的Tris-HCl缓冲液为例：先称12.11gTris碱溶于950mL～970mL去离子水中，边搅拌边滴加4NHCl，用pH计测定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水补足到1L。