第２期２００８年３月华东师范大学学报（自然科学版）ＪｏｕｒｎａｌｏｆＥａｓｔＣｈｉｎａＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ）Ｎｏ．２Ｍａｒ．２００８文章编号：１０００—５６４１（２００８）０２—００７８—０７桑黄粗多糖对肿瘤细胞增殖及转移相关能力的抑制作用赵澜，张红锋２０００６２）（华东师范大学生命科学学院，上海摘要：研究了桑黄粗多糖（ＰＬ）对高转移卵巢癌细胞（ＨＯ－８９１０ＰＭ）和乳腺癌细胞（Ｂｃａｐ－３７）增殖和转移相关能力的影响及其作用的机制．研究结果表明，桑黄粗多糖能有效抑制裸鼠移植瘤的生长，抑制率为６５．３７％；对离体培养的ＨＯ－８９１０ＰＭ和Ｂｃａｐ－３７细胞的抑制率分别达到１５．５３％和２３．８１％１５００ｐｇ／ｍｌＰＬ作用于ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞９６ｈ可诱导其凋亡，通过细胞周期ＧＯ／Ｇ１期阻滞而抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡；ＰＬ能显著抑制ＨＯ－８９１０ＰＭ的黏附、侵袭和迁移等肿瘤转移相关能力．桑黄粗多糖具有抑制肿瘤细胞增殖及肿瘤转移的作用．关键词：桑黄多糖；中图分类号：Ｒ９６１高转移卵巢癌细胞；文献标识码：Ａ乳腺癌细胞；增殖；转移ＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｓｏｆｐｏＩｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｐｈｅｌｌｉｎｕｓｌｉｎｔｅｕｓｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆＨＯ－８９１０ＰＭａｎｄＢｃａｐ。３７ＺＨＡＯＬａｎ，（Ｓｃｈｏｏｌｏ，ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＥａｓｔＣｈｉｎａＺＨＡＮＧＨｏｎｇ—ｆｅｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００６２，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｉｓｐａｐｅｒｓｔｕｄｉｅｄＰｈｅｌｌｉｎｕｓｌｉｎｔｅｕｓｏｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆＨＯ一８９１０ＰＭａｎｄＢｃａｐ－３７．Ｔｈ；ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄＰＬｉｎｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆＢｃａｐ３７ｔｕｍｏｒｉｎｖｉｖｏｂｙ６５．３７％，ｗｈｉｌｅｉｎｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｐｒｏｌｉｆ—ｅｒａｔｉｏｎｏｆＨＯ－８９１０ＰＭａｎｄＢｃａｐ－３７ｉｎｖｉｔｒｏｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｂｙ１５．５３％ａｎｄ２３．８１％．ＰＬｉｎｄｕｃｅｄＧ０／Ｇ１ｐｈａｓｅＰＬｍａｙｒｅｌａｔｅｄａｒｒｅｓｔａｎｄ５００ｐｇ／ｍｌＰＬｉｎｄｕｃｅｄＨＯ－８９１０ＰＭｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓａｆｔｅｒ９６ｈｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ．ａｒｅａｃｔａｓａｄｉｒｅｃｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆＨＯ－８９１０ＰＭｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎ，ｉｎｖａｓｉｏｎａｎｄｍｉｇｒａｔｉｏｎｗｈｉｃｈｏｎｔｏｔｕｍｏｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔＰＬｈａｓｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｔｕｍｏｒｃｅｌｌｐｒｏ—ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｆｒｏｍＰｈｅｌｌｉｎｕｓｌｉｎｔｅｕｓ｝ＨＣ卜８９１０ＰＭ；Ｂｃａｌｙ３７；ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ桑黄（Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓｌｉｎｔｅｕｓ）是担子菌亚门层菌纲多孔菌目多孔菌科针层菌属的一种珍贵收稿日期：２００７—０３第一作者：赵澜，女，硕士研究生．通讯作者：张红锋，女，副教授，主要从事中药药理学研究．Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｆｚｈａｎｇ＠ｂｉｏ．ｅｃｎｕ．ｅｄｕ．ｅｎ．万方数据 第２期赵澜，等：桑黄粗多糖对肿瘤细胞增殖及转移相关能力的抑制作用７９药用真菌，又称桑臣或桑耳，具有多种药用价值，如抗氧化［１］、抗肿瘤［２］、增强免疫力、抗炎症［３３和抗血管生成口１等，尤其是其显著的抗癌效果，引起了科学家的关注．我国是桑黄的主要原料出产国，但是有关桑黄多糖的研究起步较晚，且主要集中在其发酵条件的优化方面［４Ｊ］，而对其药用机理的研究较为鲜见，尤其是对细胞周期和肿瘤转移方面的研究还未见报道．因此我们在裸鼠移植瘤模型上研究桑黄粗多糖对乳腺癌生长的影响，并研究桑黄粗多糖对高转移人卵巢癌细胞（ＨＯ－８９１０ＰＭ）和人乳腺癌细胞（Ｂｃａｐ３７）的细胞增殖周期、凋亡及黏附、侵袭和迁移能力的影响，探讨桑黄粗多糖抗肿瘤作用的机理．１１．１材料与方法材料ＳＰＦ级雄性Ｂａｌｂ／ｅ裸鼠，鼠龄４周，体重（１８±２）ｇ，购于上海南方模式生物科技发展有限公司．整个实验过程中裸鼠均饲养在中科院上海实验动物中心．高转移人卵巢癌细胞ＨＯ－８９１０ＰＭ和人乳腺癌细胞Ｂｃａｐ一３７购自中国科学院上海生化与细胞生物学研究所细胞库．桑黄子实体由上海童童食品有限公司提供．１．２方法１．２．１桑黄粗多糖提取子实体在蒸馏水（１：２５）中１００℃煮１０ｈ，过滤去渣．９０％乙醇沉淀３次（料液比１：４），离心并干燥得桑黄粗多糖药粉．采用苯酚一浓硫酸法测得总糖含量为９０％．桑黄粗多糖药粉以ＰＢＳ溶解，经０．２２ｐ．ｍ孔径的滤膜过滤后得无菌桑黄多糖药液．１．２．２肿瘤细胞培养ＨＯ－８９１０ＰＭ的培养基是含１０％小牛血清（杭州四季青生物工程材料有限公司）的ＲＰ—Ｍ１１６４０（美国Ｇｉｂｃｏ公司），Ｂｃａｐ一３７的培养基是含１０％小牛血清的ＤＭＥＭ（美国Ｇｉｂｅｏ公司）．肿瘤细胞均培养在３７℃，５％ＣＯ：的饱和湿度恒温培养箱中．１．２．３裸鼠移植瘤实验０．２５％胰酶消化Ｂｃａｐ３７细胞，Ｄ－Ｈａｎｋ’ｓ液调整细胞密度为８×１０６个／ｍＬ，在每只裸鼠的腋下注射２００弘ＬＢｃａｐ３７细胞悬液．注射后１８ｄ，测得肿瘤体积为１００～１５０ｍｍ３，将荷瘤裸鼠随机分为空白组（ＰＢＳ组）和给药组（ＰＬ组）（由于没有合适的以及公认的多糖类阳性药物，故没有设阳性药物组），每组６只荷瘤裸鼠．空白组隔天腹腔注射２００“ＬＰＢＳ；给药组隔天腹腔注射２００弘Ｌ浓度为５ｍｇ／ｍＬ的桑黄粗多糖药液（５０ｍｇ／（ｋｇ体重·ｄ））．隔天称量体重，游标卡尺测量裸鼠肿瘤的长（Ｌ）和宽（ｗ），按Ｌ×Ｗ２ＭＴＴ比色法检测细胞增殖能力和细胞粘附能力Ｘ０．５２计算肿瘤体积并作记录．荷瘤裸鼠在给药后１７ｄ处死．剥离肿瘤组织，测量肿瘤大小和重量．１．２．４取对数生长期的Ｂｃａｐ３７细胞以２×１０４个／孔接种到９６孔板中，常规培养２４ｈ后分为空白组、ＰＬ低浓度组、ＰＬ中浓度组和ＰＬ高浓度组，分别加入１０ｐＬＰＢＳ和１０弘Ｌ不同浓度的桑黄多糖药液，使培养基中桑黄粗多糖终浓度分别为５６ｔｚｇ／ｍＬ，１６７弘ｇ／ｍＬ和５００ｐｇ／ｍＬ．继续培养４８ｈ后，将培养基吸出，每孔加入１ｍｇ／ｍＬＭＴＴ溶液１００肚Ｌ，３７℃孵育４ｈ，弃去Ｍ１ｖｒ溶液，每孔加入１００ｐＬＤＭＳＯ，在酶标仪５７０ｒｉｍ处测光吸收值．重复实验３次．ｈ，Ｄ－Ｈａｎｋ７ｓ洗涤３次．每孔中测定细胞粘附能力时，将１０ｔｕｇ（３０弘Ｌ）孔Ｍａｔｒｉｇｅｌ铺于９６孔板中，室温干燥后，用含２％牛血清白蛋白（ＢＳＡ）的ＲＰＭＩ１６４０培养液３７℃封闭１万方数据 ８０华东师范大学学报（自然科学版）２００８燕加入１００“Ｌ细胞密度为１×１０５个／ｍＬ经ＰＢＳ和１６７ｔ＿￡ｇ／ｍＬ或５００｝ｔｇ／ｍＬ桑黄粗多糖药液处理２４ｈ的ＨＯ－８９１０ＰＭ，３７℃培养１ｈ，弃去培养基，用Ｄ－Ｈａｎｋ’ｓ液将每孔中没有贴壁的细胞洗去．按ＭＴＴ法测定各孔细胞的光吸收值．重复实验３次．１．２．５流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡分别按１Ｘ１０６个／孔，接种Ｂｃａｐ一３７和ＨＯ－８９１０ＰＭ至６孔板中，２４ｈ后进行分组处理．空白组加入２００肛ＬＰＢＳ，ＰＬ低浓度组、ＰＬ中浓度组和ＰＬ高浓度组分别加入２００ｐＬ不同浓度的桑黄多糖药液，使培养基中桑黄粗多糖终浓度分别为５６ｔＬｇ／ｍＬ，１６７ｔｚｇ／ｍＬ和５００／－ｇ／ｍＬ．继续培养４８ｈ和９６ｈ后，每孔细胞经消化离心，重悬于５００“ＬＰＢＳ中．细胞经过预冷的７０％乙醇固定，ＲＮＡｓｅ处理和ＰＩ染色，流式细胞仪分析细胞周期分布和凋亡率．１．２．６Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室法检测肿瘤细胞的侵袭和迁移能力将５且ｇ（１５ｔＬＬ）Ｍａｔｒｉｇｅｌ铺于Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室，室温干燥，形成人工重组基底膜．ＨＤ８９１０ＰＭ细胞分别经０／１９／ｍＬ，１６７／＿￡ｇ／ｍＬ和５００ｔｌｇ／ｍＬＰＬ作用４８ｈ后，以０．２５％胰酶消化离心并用无血清ＲＰＭｌｌ６４０培养基调整细胞密度，以１×１０５个／孔接种至Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室．加药组分别加入不同浓度的ＰＬ，使终浓度为１６７弘ｇ／ｍＬ和５００ｐｇ／ｍＬ，对照组加入等量的ＰＢＳ．在２４孔板内每孑Ｌ加入６００弘Ｌ含２０％小牛血清的ＲＰＭＩ１６４０培养基．将Ｔｒ—ａｎｓｗｅｌｌ小室浸入２４孔板的培养基内．３７℃Ｃ０。培养箱中培养６ｈ．取出Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室，甲醇固定１ｍｉｎ，苏木晶染色５ｍｉｎ，自来水冲洗，伊红染色３０Ｓ，自来水冲洗．用棉球蘸ｎＨａｎｋ液擦拭Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室的铺胶一面，擦去未穿膜的细胞．显微镜下拍照，计数每孔中上下左右中五个视野的细胞数目，获得穿膜细胞数／视野．每组平均设３个滤膜．细胞迁移实验步骤同侵袭实验，但在Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室中不铺人Ｍａｔｒｉｇｅｌ．１．２．７统计分析所有实验数据用ＳＰＳＳ１２．０统计软件进行统计处理．各组数据表示为Ｘ±ＳＤ，对各组数据进行ｔ检测．２结果２．１桑黄粗多糖对裸鼠移植肿瘤生长的影响腹腔注射桑黄粗多糖药液可明显抑制荷瘤裸鼠肿瘤的生长，抑制率为６５．３７％（Ｐ＜０．０１）．Ｂｅａｐ－３７荷瘤鼠经过１６ｄ的注射，给药组裸鼠平均肿瘤体积为（４３２．０９±７８．７４）ｒｎｎｌ３，空白组为（１２４７．６６±３７８．１３）ｍ一．在给药过程中，空白组和给药组的裸鼠在体重上未见明显差异（图１）．Ｉ童１襄篓１８２０２２２４２６掣栅蛙２８３０３２３４天数／ｄ图１Ｆｉｇ．１天数／ｄ荷Ｂｃａｐ－３７肿瘤裸鼠的肿瘤大小和体重变化曲线ＴｈｅｅｈａｎｇｅｏｆｔｕｍｏｒｖｏｌｕｍｅａｎｄｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔｏｆｎｕｄｅｍｏｕｓｅｗｉｔｈＢｃａｐ－３７万方数据 第２期赵澜．等：桑黄粗多糖对肿瘤细胞增殖及转移相关能力的抑制作用８１２．２桑黄粗多糖对肿瘤细胞增殖能力的影响分别用５６ｔ比ｇ／ｍＬ，１６７／＿￡ｇ／ｍＬ和５００／１９／ｍＬ桑黄粗多糖作用ＨＯ－８９１０ＰＭ和Ｂｃａｐ一３７肿瘤细胞４８ｈ后，ＭＴＴ比色法检测细胞增殖，发现桑黄粗多糖能明显抑制肿瘤细胞的增殖（Ｐ＜Ｏ．０１），且具有量效关系．５６ｔ．￡ｇ／ｍＬ，１６７ｔＬｇ／ｍＬ和５００ｔ比ｇ／ｍＬＰＬ对ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞的抑制率分别为１１．４４ｏＡ，１３．３５％和１５．５３％，对Ｂｃａｐ－３７细胞的抑制率分别为１３．２４％，１４．３４％和２３．８１％（表１）．表１Ｔａｂ．１桑黄租多糖对ＨＯ－８９１０ＰＭ和Ｂｃａｐ－３７细胞增殖的影响ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＰＬＯｎＨＯ－８９１ＯＰＭａｎｄＢｃａｐ－３７ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ注；与０ｔ－ｇ／ｍＬＰＬ空白组比较，’Ｐ＜Ｏ．Ｏｌ２．３桑黄粗多糖对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响结果表明，桑黄粗多糖可诱导Ｂｃａｐ－３７和ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞周期的Ｇ０／Ｇ１期阻滞．１６７／－ｇ／ｍＬ和５００／ｘｇ／ｍＬＰＬ作用４８ｈ可使处于Ｇ０／Ｇ１期的Ｂｃａｐ一３７细胞百分率由６４．８６％升至６９．１５％和６９．５８％；使处于Ｇ０／Ｇ１期的ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞百分率由６５．４９％升至６９．２８％及６９．５５％（表２）．１６７ｂｔｇ／ｍＬ和５００／ｘｇ／ｍＬＰＬ作用ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞９６ｈ的流式细胞分析结果表明，凋亡百分率由０．５９％升至０．９３％和１．８７％（图２）．表２桑黄粗多糖作用４８ｈ对肿瘤细胞周期的影响Ｔａｂ．２ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｎＨＯ－８９１０ＰＭａｎｄＢｃａｐ－３７ｃｅｌｌｃｙｃｌｅａｆｔｅｒｔｒｅａｔｅｄｂｙＰＬｆｏｒ４８ｈ０６５．４９６９．２８６９．５５１５．２１１３．４５１３．７１１４．９２１４．９７１４．７５ＨＣｐ８９１０ＰＭ１６７５００万方数据 ８２华东师范大学学报（自然科学版）２００８年２００１６０ＰＬ０ｔｔｇ／ｍＬ耋§三１２０ａｐｏｐｔｏｓｉｓＯ．５９％芎８０４０ＯＪＤＮＡｃｏｎｔＣｎｔ∞’ＤＮＡｃｏｎｌｔｎｔＤＮＡＣＯＩｌｔｃｎｔ图２桑黄粗多糖作用Ｈ０－８９１０ＰＭ细胞９６ｈ的流式细胞分析图Ｆｉｇ．２ＦｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｎＨＯ－８９１０ＰＭａｆｔｅｒｔｒｅａｔｅｄｂｙＰＬｆｏｒ９６ｈ（Ａ）空白组２．４（Ｂ）１６７ｆｌｇ／ｍＬＰＬ加药组（Ｃ）５００／＿￡ｇ／ｍＬＰＬ加药组桑黄粗多糖对人高转移卵巢癌细胞粘附能力的影响实验结果显示，１６７ｔｔｇ／ｍＬ和５００ｔｔｇ／ｍＬＰＬ可使ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞的粘附能力下降５．３３％和１７．６２％（图３）．表明桑黄粗多糖能降低ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞异质粘附能力，从而阻止侵袭转移的发生．１．８量盒巴１．４趔絮Ｉ．ｏ督０．６Ｕ１６７５ｕｏＰＬ浓度／∽。ｍＬｌ）图３桑黄粗多糖对ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞粘附能力的抑制作用Ｆｉｇ．３ＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆＰＬｏｎＨＯ－８９１０ＰＭｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎｏｎＥＣＭ注：与０ｔｔｇ／ｍＬＰＬ空白组比较，＊Ｐ＜Ｏ．０１２．５桑黄粗多糖对人高转移卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响１６７ｔｔｇ／ｍＬ和５００ｔｔｇ／ｍＬ的ＰＬ处理ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞４８ｈ，细胞体外趋化运动能力和侵袭能力均明显降低（ｐ＜Ｏ．０１）．对细胞侵袭能力的抑制率分别是１９．１１％和３６．９９％（图４，表３），对细胞迁移能力的抑制率分别为１０．５６％和３０．５６％（图４，表４）．表３桑黄粗多糖对肿瘤细胞侵袭能力的抑制作用Ｔａｂ３ＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆＰＬＨ（）＿８９１０ＰＭｉｎｖａｓｉｏｎｏｎ表４桑黄租多糖对ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞迁移能力的抑制作用Ｔａｂ４ＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆＰＬＨＯ－８９１ＯＰＭｍｉｇｒａｔｉｏｎｏｎ注：与０弘ｇ／ｍＬＰＬ空白组比较，。Ｐ＜Ｏ．Ｏｌ注：与０ｐｇ／ｍＬＰＬ空白组比较，。Ｐ＜Ｏ．０１万方数据 第２期赵澜。等：桑黄粗多糖对肿瘤细胞增殖及转移相关能力的抑制作用８３图４桑黄粗多糖对ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞侵袭和迁移能力的影响Ｆｉｇ．４ＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆＰＬｏｎＨＯ－８９１０ＰＭｉｎｖａｓｉｏｎａｎｄｍｉｇｒａｔｉｏｎ（Ｃ）５００ｇｇ／ｍＬＰＬ侵袭实验组（Ｆ）５００ｇｇ／ｍＬＰＬ细胞迁移实验组（Ａ）侵袭实验空白组（Ｄ）细胞迁移实验空白组３（Ｂ）１６７／１９／ｍＬＰＬ侵袭实验组（Ｅ）１６７ｔ＿￡ｇ／ｍＬＰＬ细胞迁移实验组讨论对于桑黄粗多糖抗肿瘤增殖方面，本文证实桑黄粗多糖对裸鼠Ｂｃａｐ３７移植瘤的生长有明显的抑制作用，同时发现，ＰＬ对离体培养的ＨＯ一８９１０ＰＭ和Ｂｃａｐ－３７肿瘤细胞也有直接杀伤作用．比较在体和离体的实验结果，ＰＬ对移植瘤生长的抑制率可达６５．３７％，而对肿瘤细胞增殖的抑制率最高达２３．８１％，说明ＰＬ直接杀伤肿瘤细胞的作用还是比较弱的，但是与ＰＬ的免疫调节机制共同发挥作用时，则具有强大的抗肿瘤作用．目前，在体和离体实验均证实了桑黄粗多糖对肿瘤细胞生长的抑制作用和促细胞凋亡的现象．．我们发现桑黄粗多糖可以通过阻滞细胞周期于Ｇ０／Ｇ１期而抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡．ＧｅＬｉ等邸］实验发现桑黄（ｐｈｅｌｌｉｎｕｓｌｉｎｔｅｕｓ）中提取的蛋白聚糖可以诱导结肠癌细胞ＳＷ４８０的凋亡及其细胞周期Ｇ２／Ｍ期的阻滞；硫酸化多糖（ｆｕｃｏｉｄａｎ）可以诱导淋巴瘤细胞ＨＳ２Ｓ／１ｌｔａｎ凋亡．Ｊａｅ－ｓｕｎｇＢａｅ等认为，ＰＧ能抑制Ｂ１６Ｆ１０细胞中ＶＥＧＦ基因的表达，从而导致细胞凋亡［１０１．对于桑黄多糖抗肿瘤转移方面，本文发现ＰＬ能直接抑制ＨＯ－８９１０ＰＭ的黏附、侵袭和迁移等肿瘤转移的相关能力．恶性肿瘤最基本的生物学特征之一，即肿瘤转移即细胞从原发肿瘤向远端器官的扩散及其随后的生长，它是一系列具有内在联系的多个步骤相互作用的结果，也是目前引起肿瘤患者死亡的主要原因．肿瘤细胞的转移包括与基膜或细胞外基质（ＥＣＭ）的粘附、降解和穿透移行三个相互联系的基本过程．肿瘤细胞通过与ＥＣＭ的相互作用，粘附到ＥＣＭ并分泌酶降解之，然后迁移离开肿瘤的原位，粘附并侵袭血管内皮细胞，进人血管，随血液转移到新的组织，形成次级肿瘤．Ｓａｎｇ—ＢａｅＨａｎ等［７１发现桑黄多糖对黑色素瘤细胞（Ｂ１６Ｆ１０）的黏附和侵袭有明显的抑制作用，并认为桑黄多糖的抗肿瘤转移效果既与万方数据 ８４华东师范大学学报（自然科学版）２００８年免疫调节功能有关［引，也能够直接抑制肿瘤细胞的粘附及侵袭能力．Ｌｅｅ等［９］研究表明，桑黄多糖能够诱导尿激酶型血浆酶原与肿瘤细胞结合而引起血小板凝集，从而抑制黑色素瘤细胞在裸鼠体内的血行转移．目前，Ｈａｎ等正从肿瘤细胞膜上整合素与ＥＣＭ之间的相互作用方面进一步解释桑黄多糖的作用机理［７］．本文发现桑黄粗多糖通过直接抑制肿瘤细胞与ＥＣＭ的粘附和细胞的侵袭迁移能力，实现抗肿瘤转移的作用．至于其具体的细胞信号机制，还有待于进一步的研究．［参［１］ＭＩ—ＹＡＥｓ。ＴＡＥ－ＨＵＮ考文献］Ｋ，ＮＡＫ－ＪＵｓ．ＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓａｎｄｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＰｈｅｌｌｉｎｕｓｂａｕｍｉｉ（ＰｈｅｌｌｉｎｕｓｏｆＨｙｍｅｎｏｃｈａｅｔａｃｅａｅ）ｅｘｔｒａｃｔｓ［Ｊ］．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ。２００３．８４（９）：５９３—５９７．［２］张敏，纪晓光。贝祝春，等．桑黄多糖抗肿瘤作用．中药药理与临床，２００６，２２（３）：５６—５８．［３］ＳＯＮＧＹ，ＫＩＭｍｕｓｈｒｏｏｍＳＨ，ＳＡＪＨ，ｅｔａ１．Ａｎｔｉａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ。ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｎｄｘａｎｔｈｉｎｅｏｘｉｄａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｔｈｅｏｆＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２００３．８８：１１３—１１６．ＰｈｅｌｌｉｎｕｓｌｉｎｔｅｕｓＥＪ］．Ｊｏｕｒｎａｌ［４］胡文彬。马海乐，周存山．桑黄菌液体发酵培养基及发酵条件研究［Ｊ］．中国食用菌．２００６（３）：４６—５２．［５］陈瑞蓉。施亚琴，林先责．等．珍稀药用真菌桑黄菌液俸培养条件的初步研究［Ｊ］．中国食用菌，２００５（１）。４１·４４．［６］ＵＧ，ＫＩＭＤＨ，ＫＩＭＴＤ。ｅｔａ１．Ｐｒｏｔｅｉｎ—ｂｏｕｎｄｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＰｈｅｌｌｉｎｕｓｌｉｎｔｅｕｓｉｎｄｕｃｅｓＬｅｔｔｅｒｓ，２００４，２１６（１２）ｌ１７５—１８１．Ｇ２／ＭｐｈａｓｅａｒｒｅｓｔａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎＳＷ４８０ｈｕｍａｎｃｏｌｏｎｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ［７］ｓＡＮＧ—ＢＡＥＨ，ＣＨＡＮＧＷＯＯＬ，ＪＯＮＧＳＯＯＮＫ，ｅｔａ１．ＡｃｉｄｉｃｐｏｌｙｓａｅｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＰｈｅｌｌｉｎｕｓｌｉｎｔｅｕｓｉｎｈｉｂｉｔｓｍｅｌａ—ｃｅｌｌｍｅｔａｓｔａｓｉｓｂｙｂｌｏｃｋｉｎｇｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎａｎｄｉｎｖａｓｉｏｎｍＪ］．ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＩｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２００６（６）：６９７—７０２．［８］ＫＩＭＨＭ，ＨＡＮＳＢ，ＯＨＧＨ，ｅｔａ１．ＳｔｉｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｈｕｍｏｒａｌａｎｄｃｅｌｌｍｅｄｉａｔｅｄｉｍｍｕｎｉｔｙｂｙｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍｍｕｓｈｒｏｏｍＰｈｅｌｌｉｎｕｓＬｉｎｔｅｕｓ口］．ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９６，１８（５）：２９５—３０３．［９］ＬＥＥＨＪ，ＬＩＭＥＳ，ＡＨＮＫＳ，ｅｔａ１．ＣａｍｂｏｄｉａｎＰｈｅｌｌｉｎｕｓｌｉｎｔｅｕｓｉｎｈｉｂｉｔｓｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｍｅｌａｎｏｍａｍｉｃｅｖｉａｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｕｒｏｋｉｎａｓｅｔｙｐｅｃｅｌｔｓｉｎｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒ［Ｊ］．ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ，２００６，２８：２７—３１．［１０］ＪＡＥＳＢ。ＫＷＡＮＧＨＪ．ＨＹＵＮＥＥＹ，ｅｔａ１．ＰｏｌｙｓａｅｅｈａｒｉｄｅｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＰｈｅｌｌｉｎｕｓｇｒｏｗｔｈｉｎｇｉｌｖｕｓｉｎｈｉｂｉｔｍｅｌａｎｏｍｅｍｉｃｅ［Ｊ］．ＣａｎｃｅｒＬｅｔｔｅｒｓ，２００５。２１８（１）１４３—５２．（上接第５２页）［９］［ｉ０３［１１］廖世俊．同伦分析方法：一种新的求解非线性问题的近似解析方法口］．应用数学和力学，１９９８。１９（１０）：８８５—８９０．廖世俊．超越摄动：同伦分析方法导论［Ｍ］．北京ｔ科学出版社，２００６．ＬＩＡＯＳＪ．ＯｎｔｈｅｈｏｍｏｔｏｐｙａｎａｌｙｓｉｓｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｆｏｒｎｏｎｌｉｎｅａｒｐｒｏｂｌｅｍｓａｎｄｉｔｓｉｃｓａｎｄＣｏｍｐｕｔａｔｉｏｎ，２００４ｔ１４７（２）ｉ４９９—５１３．ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄＭａｔｈｅｍａｔ—［１２３ＬＩＡＯＳＪ，ＳＵｏｆＪ。ＣＨＷＡＮＧＡＴ．Ｓｅｒｉｅｓｓｏｌｕｔｉｏｎｓｆｏｒｎｏｎｌｉｎｅａｒｍｏｄｅｌｃｏｍｂｉｎｅｄｃｏｎｖｅｃｔｉｖｅａｎｄｒａｄｉａｔｉｖｅｃｏｏｌｉｎｇｓｐｈｅｒｉｃａｌｂｏｄｙ［Ｊ］．ＩｎｔＪＨｅａｔａｎｄＭａｓｓＴｒａｎｓｆｅｒ。２００６，４９２４３７—２４４５．万方数据 桑黄粗多糖对肿瘤细胞增殖及转移相关能力的抑制作用
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
赵澜， 张红锋， ZHAO Lan， ZHANG Hong-feng华东师范大学,生命科学学院,上海,200062
华东师范大学学报（自然科学版）
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