茶叶中茶多酚含量测定工作方案

一、 紫外分光光度法

1. 实验原理

在一定PH条件下，酒石酸铁能与多酚类物质反应形成蓝紫色络合物，该络合物在540nm波长下具有最大吸光度。。用分光光度法测定其含量

2. 仪器试剂

1) 仪器 名称 紫外分光光度计 电子天平 电炉 烧杯（100mL） 烧杯（500mL） 量杯（50mL） 容量瓶（100mL、250mL） 比色管（50mL） 比色皿 吸量管（2mL、5mL、10mL） 胶头滴管 2) 试剂 数量 1台 1台 1个 5个 2个 1个 各1个 7个 1个 各1根 1个 A. 酒石酸亚铁溶液:称取1.0g 硫酸亚铁(FeSO47H2O)和5.0 g 酒石酸钾钠

(C14H14O6KNa4H2O)，用水溶解并定容至1L（低温保存有效期10天)。 B. PH=7.5 磷酸盐缓冲液

1/15mol/L磷酸氢二钠:称取23.9 g 十二水磷酸氢二钠(Na2HPO412H2O)，加水溶解后定容至IL。

1/15 mol/L磷酸二氢钾:称取经110℃烘干2h的磷酸二氢钾(KH2PO4)9.08 g,加水溶解后定容至1L。

取上述 1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液85mL和1/15mol/L的磷酸二氢钾溶液15mL混合均匀。

3. 工作步骤

1) 试样的制备与测定：

称取磨碎茶叶试样0.1g(准确至0.0001g) ，置于小烧杯中，加温水30mL，溶解冷却，注入100mL容量瓶中，定容、摇匀、过滤，弃去初滤液约20mL，剩余的滤液为试液【1】。

1

取试液【1】 2mL于50mL比色管中，加酒石酸铁10mL摇匀，用PH=7.5的磷酸盐缓冲液定容。

取2mL蒸馏水于50mL比色管中，加酒石酸铁10mL摇匀，用PH=7.5的磷酸盐缓冲液定容作为空白对照，于540nm处用1cm比色皿测定吸光度值。

2) 标准系列溶液的配制与测定： 称取茶多酚纯品0.2500g，加水溶解定容至250mL，混匀，即为每毫升含1mg茶多酚

的标准溶液。

分别称取标准溶液0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL于一组50mL比色管中，各加水至10mL，再加酒石酸铁溶液10mL，用PH=7.5的缓冲液定容至刻度，混匀后用1cm比色皿，以试剂空白作参比，于波长540nm处测定吸光度，绘制出标准曲线。

4. 数据计算

茶叶中茶多酚的含量以干态质量分数表示，按下式计算：

L1A1.95721001000L2M0m茶多酚 ( % ) = 式中：L1——试液的总量,mL

L2——测定时的用液量,mL

M0——试样的质量，g m——试样干物质含量，%;

A——试样的吸光度

二、 高锰酸钾直接滴定法

1. 工作原理

茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。根据消耗1ml0.318g/ml的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。

2. 仪器试剂

1) 仪器

分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500ml白瓷皿。

2) 试剂

A. 0.1%靛红溶液：

称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50ml，冷却后用蒸馏水定容至1000ml，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称

2

取靛红1g，加浓硫酸50ml，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000ml，过滤后贮于棕色瓶中。

B. 0.630%草酸溶液：

准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000ml。

C. 高锰酸钾标准溶液：

称取AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000ml。准确吸取0.630%草酸溶液10ml，放入250ml锥形瓶中（平行2份），加入蒸馏水50ml，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10ml，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边颠边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。按下式计算高锰酸钾溶液

100.63的浓度：ω（kMnO4浓度，%）= kMnO4

3. 工作步骤

1) 供测试液的准备：

准备称取茶叶磨碎样品1g，放在200ml三角烧瓶中，加入沸蒸馏水80ml，在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100ml容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100ml，摇匀。 2) 测定：

取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液5ml，再加入供测试液5ml，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/s为宜，接近终点时应慢滴。直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。同时做空白测定。

4. 结果计算

X=

(AB)w0.00582/0.318

mV1/V2X—茶多酚的含量，%

B—空白消耗的高锰酸钾毫升数，ml A—样品消耗的高锰酸钾毫升数，ml ω--高锰酸钾的浓度，% m—样品的质量g

V1—测定用供测试液的体积，ml V2--供测试液的体积，ml

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