２０１３年８月５日第２２卷第ｌ５期 中目茄 ・药物鉴定・ Ｖｏ１．２２，Ｎｏ．１５，Ａｕｇｕｓｔ ５，２０１３ Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｎｌｓ Ｄｒｕｇ Ｉｄｅｎｌｉｆｉｃｅ＃ｏｎ 注射用雷贝拉唑钠细菌内毒素检查法的建立 范治云，王春芳，张娟 （山东省食品药品检验所，山东济南 ２５０１０１） 摘要：目的考察注射用雷贝拉唑钠对细菌内毒素检查试验的干扰情况，并建立其细菌内毒素检查的方法。方法参照２０１０年版《中国 药典（二部）》附录ⅪＥ进行凝胶法试验，并与动态浊度法比较。结果供试品对细菌内毒素检查无干扰作用。结论所建立的方法可用于 注射用雷贝拉唑的细菌内毒素检查。 关键词：注射用雷贝拉唑钠；动态浊度法；凝胶法；细菌内毒素；干扰试验 中图分类号：Ｒ９２７．１１；Ｒ９７５ ．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６—４９３１（２０１３）１５—００４７—０２ 雷贝拉唑钠是一种新型质子泵抑制剂，用于治疗酸相关性疾 表１ 注射用雷贝拉唑钠凝胶法干扰预试验结果 病，国内现已上市的有肠溶片及胶囊，均为口服制剂” 。我国某公 司研制了注射用雷贝拉唑钠，但未见其热原或细菌内毒素的质量 标准。为此，笔者按照２０１０年版《中国药典（二部）》附录收载的方 法，分别采用凝胶法和动态浊度法进行干扰试验，建立了注射用 雷贝拉唑钠细菌内毒素检查法。现报道如下。 １试验材料 注射用雷贝拉唑钠（规格为每支２０ ｍｇ，批号为２０１１１１０５，国 ４管，同时做阴性对照和标准对照。结果见表２。可见，Ｂ在０．５ 内某公司产品）。细菌内毒素工作标准品（批号为１５０６０１— ２．０ ，Ｅ均在０．５Ｅｓ－２．０Ｅｓ，表明供试品质量浓度在０．０３３ ３ ｇ／Ｌ ２０１０７０，效价１４０ ＥＵ／支，中国药品生物制品检定所）。鲎试剂 时对试验无干扰作用。 （ＴＡＬ，批号为１１０２２４０，湛江博康海洋生物有限公司，规格为每支 表２ 注射用雷贝拉唑钠凝胶法细菌内毒素干扰试验结果 ０．１ ｍＬ；批号为１１０３１７２，湛江安度斯生物有限公司，规格为每支 ０．１ ｍＬ）；灵敏度（ ）均为０．２５ ＥＵ／ｍＬ，且经灵敏度复核均符合 规定。动态比浊法鲎试剂（湛江安度斯生物有限公司，批号为 １１０６１６１，可测内毒素范围０．０１—１０ＥＵ／ｍＬ，规格为每支１．２５ ｍＥ）。 细菌内毒煮检查用水（ＢＥＴ用水，批号Ｗ２０１０—１，内毒素含量不 超过０．０１５ ＥＵ／ｍＬ，中国药品生物制品检定所）。 ２ 方法 与结果 ２．４ 动态浊度法干扰试验 ２．１ 细菌内毒素限值（￡）的确定 细菌内毒素标准曲线的建立和可靠性分析：以ＢＥＴ用水将 根据Ｌ：Ｋ／Ｍ，Ｋ＝５ ＥＵ／（ｋｇ．ｈ），Ｍ是人每１ ｋｇ体重每１ ｈ 细菌内毒素标准品进行稀释，使其最终细菌内毒素浓度分别为 的最大用药量，本品成人一次最大剂量为２０ ｍｇ，人均体重按６Ｏ ２．０，０．５，０．１２５，０．０３１ ２５ ＥＵ／ｍＬ，各取０．１ ｍＬ，分别加到预先加 计算，则Ｍ为０．３３３ ｍｇ／（ｋｇ・ｈ），计算得Ｌ＝１５ ＥＵ／ｍｇ。确定 有０．１ ｍＬ鲎试剂的反应管内，混合均匀，插入ＢＥＴ一４８Ｇ型细菌 为１５ ＥＵ／ｍｇ。 内毒素检测仪内进行检测，每一浓度重复３管，同时做阴性对照 ２．２ 供试品有效稀释质量浓度的确定 （ＮＣ）。以平均反应时间的对数（１ｇＴ）为纵坐标、内毒素浓度（Ｃ）为 目前市售常用鲎试剂灵敏度（Ａ）为０．５ ０．０３ ＥＵ／ｍＬ，根据 横坐标绘制标准曲线，回归方程为ｌｇＴ：一０．２７６４３ｌｇＣ＋２．８５５ ２４， Ｄ：Ｃ・三／Ａ，故相应有效稀释质量浓度为０．０３３ ３～０．００２ １ ｇ／Ｌ。 ｒ＝一０．９９３ ８（绝对值应大于０．９８０），平行管之间的ＲＳＤ均小于 ２．３凝胶法干扰试验 １０％，阴性对照的反应时间大于标准曲线最低浓度的反应时间， 供试品干扰预试验：先以ＢＥＴ用水将供试品稀释成０．０３３ ３， 细菌内毒素标准曲线成立。结果见表３。 ０．０１６ ７，０．００８ ３，０．００４ ２，０．００２ １ ｇ／Ｌ的系列质量浓度，分别用 表３ 动态浊度法细菌内毒素标准曲线及可靠性分析（ｎ＝３） 上述两个厂家的鲎试剂考察上述质量浓度稀释液的干扰情况，每 一质量浓度做２管，同时做阴性对照和标准对照。结果见表１。可 见，供试品在上述系列质量浓度下对试验均无干扰作用。 供试品干扰试验：用ＢＥＴ用水和供试品原液将同一支细菌 内毒素工作标准品分别制成２．０ ，１．０入，０．５ ，０．２５入（即０．５， ０．２５，０．１２５，０．０６２ ５ ＥＵ／ｍＬ）的系列浓度，分别用上述两个厂家 的鲎试剂考察供试品在０．０３３ ３ ｍｇ／ｍＬ的干扰情况，每一浓度做 干扰试验：根据标准曲线内毒素浓度的设置，选择０．２５ ＥＵ／ｍＬ 作者简介：张光仁，男，学士，副主任中药师，研究方向为中药 一册）［ｓ］ 药品检验与标准，（电子信箱）ｄｚｚｇｒ＠１２６．ｃｏｍ。 ［２］国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）［Ｍ］．北京：中国医药 参考文献： 科技出版社，２０１０：１６０． ［１］ＷＳ３一Ｂ一００４８—８９．中华人民共和国药品标准・中药成方制剂（第 （收稿日期：２０１２—０７—３１；修回日期：２０１３—０３—２１） ４７
